正確安裝厭氧培養(yǎng)箱的方法介紹

用    途： 

         用于乳酸菌飲料中乳酸菌的菌落計(jì)數(shù)(GB/T16347-1996，GB/T4789.35-2003)。 原    理： 

         大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子；葡萄糖和乳糖為可發(fā)酵糖類提供碳源；乳酸菌發(fā)酵糖產(chǎn)酸使菌落周圍碳酸鈣溶解，以辨別乳酸菌；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；中性紅為pH指示劑。 配方（每升）： 大豆蛋白胨5g 牛肉膏粉5g 酵母膏粉5g 葡萄糖20g 乳糖20g 碳酸鈣10g 瓊脂15g 中性紅0.05g 

**終pH6.0±0.2  保加利亞乳桿菌 As1.1482  良好 

平皿底為粉紅色，菌落較小，圓形，紅色，邊緣似星狀，直徑2±1mm，可有淡淡的暈 乳鏈球菌      良好 

平皿底為粉紅色，菌落較小，圓形，紅色，邊緣整齊，可有淡淡的暈 

正確安裝厭氧培養(yǎng)箱的方法： 

    1. 厭氧培養(yǎng)箱應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置，應(yīng)避免陽光直曬和遠(yuǎn)離采暖設(shè)備，放置平穩(wěn)； 

    2. 將混合氣瓶、氮?dú)馄堪卜牌椒€(wěn)，并分別裝好減壓閥（含壓力表），安置在適當(dāng)位置；     3. 接上氣路并檢查氣路，為防止漏氣，必要時(shí)可在各接管處用密封膠粘合； 使用 

（一）操作室厭氧環(huán)境形成： 

    1. 按使用要求放置好必要的附件和器具，并向操作室內(nèi)放入二個(gè)無毒塑料袋；     2. 通電源開照明燈，開溫控儀，調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度； 

    3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑，并放入美蘭指示劑（封閉）； 4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗(yàn)；     5. 操作室內(nèi)**次置換（氮?dú)庵脫Q）： 

       A. 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口，另一頭插入塑料袋； 

       B. 接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開氮?dú)饪刂崎y1，使二只塑料袋充足氮?dú)?，關(guān)閉閥門1，然后扎緊袋口； 

       C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊； 

       D. 把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸放于操作室內(nèi)，**全部放出。 

     6. 操作室第二次置換（氮?dú)庵脫Q）重復(fù)一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣。 

     7. 操作室第三次置換（混合氣體置換）：（混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%）        A. 調(diào)換氣路打開混合氣閥3進(jìn)氣，充氣時(shí)取樣室先抽真空，并隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣； 

       B. 混合氣充滿塑料袋后，關(guān)掉混合氣閥，并打開閥5，使混合氣經(jīng)過流量計(jì)，調(diào)整流量計(jì)，流量為每分鐘10ml左右； 

       C. 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)； 

       D. 通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。 

     8. 操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧，一小時(shí)后開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變色情況，不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境；      9. 開紫外線滅菌燈，室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理，滅菌時(shí)間按具體實(shí)驗(yàn)自定。  （二）菌種的置入和培養(yǎng)：      1. 檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之； 

     2. 打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門； 

     3. 取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打開氮?dú)忾y2進(jìn)氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉閥2。第二次重復(fù)操作一次。第三次操作時(shí)，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打開閥4進(jìn)混合氣，使指針回復(fù)零位，后掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束；      4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)； 

     5. 取樣室內(nèi)外門開啟、關(guān)緊，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）檢驗(yàn)； 

     6. 厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件： A. 每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察，如不正常就必須重新?lián)Q氣； B. 要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體，使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康难?/div>